Conţinut
- etape
- Metoda 1 Observați direct bacteriile
- Metoda 2 Măsurarea biomasei
- Metoda 3 Procedați prin turbidimetrie
Există mai multe modalități de a măsura creșterea bacteriilor, iar unele sunt mai dificile decât altele. Cele mai simple sunt utilizate frecvent și dau rezultate relativ exacte, cu condiția să fie riguroase în timpul măsurărilor. Cele mai frecvente tehnici sunt observarea și numărarea bacteriilor, măsurarea biomasei și biomasei uscate și turbidimetrie. Laboratorul dvs. școlar ar trebui să aibă echipamentul necesar pentru cel puțin una dintre aceste metode.
etape
Metoda 1 Observați direct bacteriile
-
Pregătiți echipamentul. În plus față de ceea ce se găsește de obicei în toate laboratoarele de biologie, veți avea nevoie de câteva elemente specifice. Asigurați-vă că aveți la îndemână toate instrumentele și containerele la îndemână, astfel încât nu trebuie să vă întoarceți înainte și înapoi în dulapul în care este depozitat echipamentul. Gândește-te dinainte la ceea ce vei face pentru a ști ce vei folosi în fiecare etapă. De asemenea, va trebui să știți câțiva termeni cheie.- Obțineți un hematicometru. Este o lamă cu camere de numerație care este asociată la un microscop. Este un instrument foarte ușor de ajustat și utilizat. Puteți găsi unele de la furnizori specializați în echipamente pentru școli și laboratoare de cercetare. De obicei este oferit un manual de utilizare.
- Ia o farfurie petri. Acesta este un recipient mic, rotund și superficial, unde puteți observa bacteriile.
- Termenul „cultură” se referă la un microorganism care este propagat artificial ca parte a unui experiment științific.
- „Bulionul culturii” este mediul în care se va dezvolta cultura.
-
Folosiți vasul Petri. Puneți bacteriile în cutie și observați-o la microscop. Puteți, de asemenea, să-l puneți direct pe o lamelă. Apoi numărați numărul de celule bacteriene prezente. -
Asigurați-vă că aveți concentrația corectă. Dacă există prea multe bacterii, acestea se vor suprapune și nu le vei putea număra corect. Dacă este cazul, diluați cultura amestecând-o cu puțin bulion. Dacă sunt prea puține, rezultatul nu va fi semnificativ. Apoi, trebuie să filtrați bulionul pentru a crește concentrația. -
Numărați bacteriile. Ultimul pas este pur și simplu să numeri. Priviți camerele de numărare de sub microscop și observați numărul de celule pe care le vedeți. Comparați rezultatul cu alte experiențe similare.
Metoda 2 Măsurarea biomasei
-
Verificați dacă aveți instrumentele necesare. Această metodă este lentă de implementare și implică utilizarea de echipamente scumpe. Dacă nu îl spălați, folosiți o altă tehnică. Pe de altă parte, dacă laboratorul în care vă aflați are instrumentele potrivite, măsurarea biomasei și a masei uscate este ideală, deoarece dă rezultate precise. Ai nevoie de:- un cuptor hidraulic cu convecție forțată,
- o tavă de cântărire din aluminiu,
- mai multe baloane Erlenmeyer,
- o centrifugă sau un sistem de filtrare de laborator.
-
Verificați dacă recolta este într-un balon Erlenmeyer. Dacă nu este cazul, turnați-l. În această etapă a experimentului, bacteriile sunt încă în bulionul de cultură. Acestea vor fi separate mai târziu. -
Uscați tava de cântărit. Pentru aceasta, introduceți-l în cuptor. Puteți utiliza, de asemenea, un filtru cu membrană de acetat de celuloză cu diametrul de 47 mm cu pori de 0,45 μm. Indiferent de instrumentul folosit, măsurați-i masa cu precizie, astfel încât să poată fi scăzute din rezultatele obținute atunci când cultura este plasată pe ea. -
Mix. Agitați linlenmeyer astfel încât cultura să fie omogenă. Într-adevăr, din cauza gravitației, celulele tind în mod natural să cadă la fundul recipientului. Așadar, trebuie să vă agitați puțin pentru care sunt distribuite în mod uniform și pentru ca proba dvs. să fie mai reprezentativă. -
Centrifuga. Folosind centrifuga, separați bacteriile de bulionul de cultură. Acest dispozitiv este folosit pentru a transforma containerul și un contragreutate la o viteză foarte mare. Bulionul curge, care păstrează doar materia vie. Pentru mai multe informații, veți găsi informații despre cum să utilizați o centrifugă pe internet. -
Ia aluatul. Aruncați-o pe tava de cântărit. Puteți arunca bulionul de cultură, nu veți mai avea nevoie de el, dar țineți linlenmeyer la îndemână. -
Clătiți centrifuga. Turnați apa de clătire pe tava de cântărit, pe lângă celulele bacteriene. Rezultatul obținut pentru tot vă oferă biomasă. -
Găsiți masa uscată. Pentru a cunoaște biomasa uscată a eșantionului, introduceți vasul de cântărire în cuptorul setat la 100 ° C pentru o perioadă de 6 până la 24 de ore, conform instrucțiunilor furnizate cu dispozitivul dumneavoastră. Aveți grijă să nu depășiți această temperatură pentru a evita arderea bacteriilor. Apoi cântărește totul, apoi scade masa tavii.
Metoda 3 Procedați prin turbidimetrie
-
Pregătiți-vă echipamentul. Veți avea nevoie de o sursă de lumină și un spectrofotometru, un dispozitiv găsit în majoritatea laboratoarelor științifice. Consultați manualul de utilizare furnizat, deoarece fiecare model are propria funcționare. Această metodă este una dintre cele mai des utilizate pentru măsurarea creșterii bacteriene, deoarece necesită doar instrumente ieftine și ușor de utilizat. -
Aduceți lumină în cultură. Turbiditatea este utilizată pentru a evalua conținutul unui lichid în particule, se determină dacă este mai mult sau mai puțin tulbure. Rezultatul pe care îl veți obține din această măsurare va fi dat în NTU (sau unități de turbiditate neferometrice). Poate fi necesar să efectuați o calibrare a dispozitivului pentru a măsura cu precizie turbiditatea eșantionului. -
Ia notițe. Turbiditatea este cantitatea de bacterii din eșantion. Spectrofotometrul vă va permite, de asemenea, să cunoașteți transmitența soluției (% T), a cărei valoare este invers proporțională cu cea a turbidității. Apoi comparați rezultatele obținute pe diferite eșantioane pentru a măsura creșterea bacteriană.